Chemieprotokoll Dnnschicht-Chromatografie Das Wort Chromatographie kommt aus dem lateinischen und heit in etwa mit Farbe schreiben. In der Chemie versteht man darunter eine Technik zur analytischen Trennung von Stoffen. Bei der Dnnschicht-Chromatographie (DC) verwendet man eine feste Phase auf einem Trgermaterial (meist eine Glasplatte), auf der die zu untersuchenden Stoffe getrennt werden. Die feste Phase besteht hufig aus Kieselgel, welches sehr fein auf dem Trgermaterial verteilt ist. Chromatographie von Blattfarbstoffen — Chemie - Experimente. Auf die DC-Platten trgt man mit Hilfe einer Kapillare die Proben punktfrmig entlang der Startreihe auf und lsst sie eintrocknen. Anschlieend stellt man die DC-Platte in eine Trennkammer, die gerade soviel von der mobilen Phase (Laufmittel) enthlt, dass die Startlinie knapp ber dem Flssigkeitsspiegel ist. Das Laufmittel steigt die beschichtete Glasplatte hoch (Kapillarkrfte) und nimmt den Stoff (die Probe) aufgrund unterschiedlicher Verzgerung der Wandergeschwindigkeiten unterschiedlich weit mit (Adsorption).
Wenn die Adsorptionskraft fr einen bestimmten Stoff zu gro wird und er nicht mehr mit der mobilen Phase weiterwandern kann, setzt sich der Stoff ab und es bildet sich ein Fleck dieses Stoffes auf einer bestimmten Hhe. Auf diese Weise kann man Farbstoffgemische auftrennen und zeigen, dass eine scheinbar einfarbige Lsung aus vielen verschiedenfarbigen Komponenten besteht. Substanzen ohne sichtbaren Farbstoff knnen unter UV-Licht sichtbar gemacht werden. Dünnschichtchromatographie blattfarbstoffe rf wert in the bible. Versuch 4: Trennung von Blattfarbstoffen Um die Rohchlorophylllsung zu erhalten, schneidet man frische Bltter klein, gibt Quarzsand und Kalk (CaCO3) dazu und zerreibt sie unter Zusatz von etwa 10ml Aceton (C3H6O) gut mit einem Mrser in einer Reibschale. Anschlieend wird die Substanz filtriert und man erhlt eine grne Rohchlorophylllsung. (Die Lsung sollte ber ein krftiges dunkles Grn verfgen) Danach wird das Fliemittel vorbereitet. Es besteht aus 5ml Benzin, 5ml Petrolther und 1ml Propanol-2. Das Laufmittel wird letztlich nur noch durchgeschwenkt.
Diesen Standard muss man parallel auf einer anderen Folie ermitteln. Dadurch hat man einen weiteren Wert, den man zur Identifikation heranziehen kann. Dünnschichtchromatographie · Prinzip & Auswertung · [mit Video]. Unterschied zwischen Dünnschichtchromatographie und Säulenchromatographie Die Säulenchromatographie beruht auf den gleichen Trennprinzipien wie die Dünnschichtchromatographie, nur ist hier der Aufbau, wie der Name schon sagt, in einer Säule verpackt. Diese ist gefüllt mit einem Packungsmaterial, das hier dieselbe Funktion erfüllt wie die Sorbensschicht bei der Dünnschichtchromatographie. Hierbei wird aber die Bewegung der mobilen Phase nach oben nicht durch Kapillarkräfte erzeugt, sondern mit Druckluft durch die stationäre Phase gepresst. Dadurch lässt sich die Fließgeschwindigkeit frei einstellen, was eine bessere Reproduzierbarkeit der Ergebnisse ermöglicht. Außerdem misst man in der Säulenchromatographie nicht die zurückgelegte Wegstrecke, sondern die Zeit, die die einzelnen Bestandteile brauchen, um das gesamte Packungsmaterial zu durchqueren.
Grünes Chlorophyll wird im Herbst tiefer im Stamm eingelagert, orange und rote Carotinoide bzw. Xantophylle kommen dann zum Vorschein. Video
Sobald diese bis zum Überlauf gefüllt ist fließt das Extrakt in den Rundkolben zurück. So kann man eine dauernde Extraktion ohne zusätzliches Lösungsmittel gewährleisten. Nach 3-4 Stunden ist der Extraktionsvorgang beendet. (Quelle: Römpp Chemielexikon) Trennung Das durch die Extraktion erhaltene Brennnesselextrakt wird mit Hilfe einer Kappilarpipette auf die vorher erstellten Startlinien verschiedener DC-Platten aufgetragen. Diese DC-Platten werden in Kammern mit verschiedenen Laufmittelzusammensetzungen gestellt. Nach dem Durchlaufen der DC-Platte wird die Laufmittelfront markiert. Dünnschichtchromatographie blattfarbstoffe rf wert 2017. Daraus, und aus der Laufstrecke der Analyten werden dann die Rf-Werte ermittelt. Aktivität Um Platten mit verschiedener Aktivität zu erhalten, wird je eine Platte in einem Trockenschrank getrocknet (hohe Akt. ), und eine andere in einer, mit Wasserdampf gesättigten, Kammer gelagert (geringe Akt. ). Bestimmung von Carotin Es werden 200 μl des Brennnesselextraktes dünnschichtchromatographisch getrennt. Das so abgetrennte ß-Carotin wird in 3 ml Aceton gelöst, und anschließend photometrisch die Transmission der erhaltenen Lösung bestimmt.
Das pflanzliche Material wird dann im Mörser mit etwas Sand versehen und vollständig mit Ethanol bedeckt. Durch Zerreiben werden die Pflanzenfarbstoffe rasch extrahiert und der Ethanol nimmt eine intensiv-grüne Farbe an. Durch Filtration über einen Faltenfilter werden alle störenden Schwebstoffe entfernt. Insbesondere für die UV/VIS-Spektroskopie muss die Probenlösung klar sein. Dünnschichtchromatographie: Für die Dünnschichtchromatographie muss zuerst das Laufmittel hergestellt werden: Dazu wird Cyclohexan und Ethylacetat im Verhältnis 3:1 gemischt. Für ein handelsübliches 450 g Marmeladenglas – das als Entwicklungskammer zweckentfremdet wird - sind ca. 10-15 mL Laufmittel notwendig. Dünnschichtchromatographie blattfarbstoffe rf west virginia. Es werden also zuerst 9 mL Cyclohexan gefolgt von 3 mL Ethylacetat in das Glas pipettiert und durch Schwenken vermischt. Um die Kammer mit Dampf zu sättigen, werden die Wände mit Küchenpapier ausgekleidet. Durch den Kontakt mit dem Laufmittel haften diese von selbst am Glas. Während sich die Kammer äquilibriert, wird die DC Platte vorbereitet.
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