Polymerase Kettenreaktion Arbeitsblatt, Kirchenkreis Norden – Kirchenkreis Norden

July 14, 2024, 5:40 am

Gentechnik II - Identifizierungsmethoden Ablauf der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) Gentechnik II - Identifizierungsmethoden Ablauf der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) Aufgabe 6 Bennene die Phasen der Polymerase-Kettenreaktion!

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Nach 30 solcher Zyklen hat man bereits 1 Milliarde DNA-Kopien aus der ursprünglichen DNA gefertigt. Das reicht dann auch für die meisten Zwecke. Anwendungsgebiete der PCR Forensik Das bekannteste Anwendungsgebiet der PCR ist sicherlich die Erstellung eines genetischen Fingerabdrucks (genetic fingerprint). Dieses Verfahren wird in der Kriminalistik zur Erkennung von Tätern eingesetzt. Jeder Täter hinterlässt Spuren am Tatort, sei es in Form von verlorenen Haaren, Hautschuppen, Blut, Sperma oder Speichel. Ein einziges Haar genügt den Biologen und Gerichtsmedizinern, um ein genetisches Profil des Täters zu erstellen. Dazu wird die Täter-DNA zunächst vervielfacht, und zwar mithilfe der PCR. Polymerase kettenreaktion arbeitsblatt in 2020. Von den in Frage kommenden Verdächtigen werden Speichelproben genommen und ebenfalls der PCR unterworfen. Die Täter-DNA und die Verdächtigen-DNA wird nun auf eine gelartige Folie gegeben und dann einer Gelelektrophorese unterzogen. Die Täter-DNA ergibt im UV-Licht ein typisches Bandenmuster, die DNA der Verdächtigen ebenfalls.

Denaturierung: Die DNA wird auf ca. 90°C erhitzt, womit sich die Wasserstoffbrückenbindungen zwischen dem komplementären Basen auflösen. Damit wird die DNA in ihre Einzelstränge aufgetrennt. Hybridisierung: Bei ca. 60°C lagern (Annealing) sich die spezifischen Primer an die 3' Enden der DNA Einzelstränge an. Es gilt das Prinzip der Komplementarität: Die Primer können sich gemäß ihrer Basen nur an ein komplementäres Gegenstück (Adenin mit Thymin und Cytosin mit Guanin) anlagern. Polymerase-Kettenreaktion (PCR). Polymerisation: Die Temperatur wird auf ungefähr 70°C erhöht. DNA-Polymerasen beginnen an den Primern von 3' nach 5' mit der Anlagerung von komplementären Basen (Elongation). Am Ende sind aus zwei DNA-Einzelsträngen, zwei DNA-Doppelstränge entstanden. Nun findet wie eben schon erwähnt eine Wiederholung dieser drei Schritte vor.

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Mullis erhielt von seiner Firma die lächerlich geringe Summe von 10. 000 Dollar als Anerkennung für seine Erfindung. Später verkaufte diese Firma das PCR-Patent für 3 Millionen Dollar weiter (aus heutiger Sicht auch eine sehr geringe Summe für eine solch wichtige Erfindung). 1993 erhielt Mullis dann aber den Nobelpreis für Chemie, so dass er doch noch eine angemessene Anerkennung für seine Erfindung erhielt. Grundprinzip der PCR 1. Denaturierung Bei 95°C wird die doppelsträngige DNA, die vervielfältigt werden soll, aufgeschmolzen (in Einzelstränge gespalten). Aufschmelzen der DNA Autor: Ulrich Helmich 2022, Lizenz: siehe Seitenende Die H-Brücken, welche die Basenpaare zusammenhalten, sind zwar einzeln betrachtet nur sehr schwach, in ihrer Gesamtheit jedoch entwickeln die vielen H-Brücken eines Doppelstrangs eine ganz schöne Bindungskraft. Proteine denaturieren bereits bei 40 oder 50 ºC, während die DNA erst bei über 90 ºC aufschmilzt. 2. Polymerase kettenreaktion arbeitsblatt definition. Anlagerung der Primer Die beiden DNA-Primer-Moleküle, die schon vorher zugesetzt worden sind, lagern sich bei 60°C an die Einzelstränge an.

Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR - Polymerase-Chain-Reaction) ist ein künstliches Verfahren zur Vervielfältigung von DNA. Praktische Anwendung findet sie etwa bei Vaterschaftstests, Untersuchung des genetischen Fingerabdrucks bei Kriminalverbrechen oder zum Nachweis von Krankheiten (genetische Krankheiten als auch Virusinfektionen) In einem sogenannten Thermocycler wird die zu vervielfältigende DNA mit freien Nukleotiden, DNA-Polymerasen und speziellen Primern zusammengebracht. Der Thermocycler ermöglicht dann einen automatischen Ablauf der PCR, denn es sind mehrere Zyklen notwendig bis genügenden DNA vervielfältigt wurde. Bereits ein DNA-Doppelstrang genügt, um das Verfahren anzuwenden. Pro Zyklus steigt die Zahl der DNA-Doppelstränge dann exponentiell an (1-2-4-8-16 usw. ), sodass nach 30-50 Zyklen genügend Erbgut zur Verfügung steht. Jedoch werden bei der Polymerase-Kettenreaktion keine kompletten DNA-Doppelstränge vervielfältigt, sondern nur zuvor festgelegte Teilabschnitte. Polymerase kettenreaktion arbeitsblatt in 2. Diese Teilabschnitte kann man sehr präzise durch künstlich synthethisierte Primer festlegen.

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Lernziele Wenn Sie diese Seite durchgearbeitet haben, sollten Sie wissen wie die Polymerase-Kettenreaktion im Prinzip abläuft, aus welchen Phasen die PCR besteht, welche Anwendungsbeispiele es für die PCR gibt. Das Grundprinzip der Polymerase-Kettenreaktion (engl. polymerase chain reaction = PCR) ist ganz einfach: "Man braucht nur ein Reagenzglas, ein paar Zutaten und eine Wärmequelle", so Kary B. Mullis, der Erfinder der PCR [3]. In den USA gibt es sogar eine Firma, die ein PCR-Kit für ca. 40 Dollar an Privatleute verkauft, damit sie in ihrer Küche mit einfachsten Hilfsmitteln ihre eigene DNA vervielfältigen können [4]. Erfindung der PCR Das Verfahren der PCR wurde im Jahre 1983 von dem Amerikaner Kary Banks Mullis erfunden, als er nachts im Mondschein mit seiner Freundin im Auto unterwegs war. Behauptet er jedenfalls. Die Idee wurde von seinen Kollegen zunächst belächelt. Gentechnik II - Identifizierungsmethoden Ablauf der Polymerase-Kettenreaktion (PCR). So einfach, wie Mullis es darstellt, kann man doch keine DNA vervielfachen, dachten die meisten wahrscheinlich. Dann erkannten die Biologen aber langsam das gewaltige Potenzial, das hinter dieser PCR-Methode steckt.

Die Taq-Polymerasen synthetisieren wieder die Tochterstränge, dann folgt wieder der Schritt 1 (Aufspalten der Doppelstränge), der Schritt 2 (Anlagerung der Primer) und der Schritt 3 (DNA-Synthese), und so geht das immer weiter. Die Anzahl der DNA-Polymerase-Moleküle und die Zahl der eingesetzten DNA-Primer wächst natürlich mit jedem Zyklus. Am Anfang mussten nur 2 Primer für jede Ur-DNA eingesetzt werden. Nach dem 1. Zyklus sind bereits 4 Primer notwendig, nach dem 2. Zyklus 8 Primer-Moleküle und so weiter. Das Gleiche gilt für die Moleküle der DNA-Polymerase. Ernst Klett Verlag GmbH, Stuttgart. Aber da die PCR in vitro ("im Glas") durchgeführt wird, ist die Zugabe dieser wichtigen Moleküle kein Problem. ➥ PCR-Graphik mit drei Zyklen Sie können hier eine Graphik herunterladen, die drei komplette PCR-Zyklen zeigt. Für diese Webseite ist die Graphik zu groß (vor allem zu lang), daher habe ich sie in eine eigene Datei ausgelagert. Thermocycler Ein ganzer Zyklus dauert nur wenige Minuten, weil man heute programmierbare Geräte einsetzt, so genannte Thermocycler, die die PCR quasi von selbst durchführen.

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